Renal ischemia/reperfusion (RI/R) is a critical clinical outcome with slightly reported improvement in
mortality and morbidity. Efective therapies are still crucially required. Accordingly, the therapeutic
efects of esculin (ESC, LCESI‑MS/MS‑isolated compound from Vachellia farnesiana lowers extract,
with reported P2X7 receptor inhibitor activity) alone and in combination with erythropoietin (EPO)
were investigated against RI/R injury and the possible underlying mechanisms were delineated. ESC
and EPO were administered for 7 days and 30 min prior to RI, respectively. Twenty‑four hour following
reperfusion, blood and kidney samples were collected. Results revealed that pretreatment with either
ESC or EPO reduced serum nephrotoxicity indices, renal oxidative stress, inlammatory, and apoptosis
markers. They also ameliorated the renal histopathological injury on both endothelial and tubular
epithelial levels. Notably, ESC markedly inhibited P2X7 receptors and NLRP3 inlammasome signaling
(downregulated NLRP3 and Caspase‑1 gene expressions), whereas EPO signiicantly upregulated
PI3K and Akt gene expressions, also p‑PI3K and p‑Akt levels in renal tissues. ESC, for the irst time,
demonstrated efective protection against RI/R‑injury and its combination with EPO exerted maximal
renoprotection when compared to each monotherapy, thereby representing an efective therapeutic
approach via inhibiting oxidative stress, inlammation, renal tubular and endothelial injury, apoptosis,
and P2X7 receptors expression, and activating PI3K/Akt pathway.

يُعد الإقفار/إعادة التروية الكلوية من الحالات السريرية الحرجة التى لم يحرز فيها سوى تحسينات طفيفة فى معدلات الوفيات والإصابة بالمرض. ولا تزال هناك حاجة ماسة إلى علاجات فعّالة. ولذلك، تم فى هذه الدراسة تقييم التأثيرات العلاجية لمركب الإسكولين، وهو مركب معزول بتقنية LC–ESI–MS/MS من مستخلص نبات طلح الفتنة أو السنط العربى ويُعرف بنشاطه كمثبط لمستقبل P2X7، سواء بمفرده أو بالتشارك مع الإريثروبويتين، ضد إصابة الكلى الناتجة عن الإقفار/إعادة التروية، مع توضيح الآليات المحتملة الكامنة وراء هذا التأثير.

تم إعطاء الإسكولين للجرذان لمدة 7 أيام، بينما أُعطى الإريثروبويتين قبل 30 دقيقة من بدء الإقفار. وبعد مرور 24 ساعة من إعادة التروية، تم جمع عينات الدم والكلى لتحليلها. أظهرت النتائج أن المعالجة المسبقة بكل من الإسكولين أو الإريثروبويتين أدت إلى انخفاض مؤشرات السمية الكلوية فى الدم، والإجهاد التأكسدى الكلوى، والعلامات الالتهابية ومؤشرات موت الخلايا المبرمج. كما حسّنا من التلف النسيجى فى الكلى على مستوى كل من الخلايا البطانية والخلايا الظهارية الأنبوبية.

ومن الجدير بالذكر أن الإسكولين أدى إلى تثبيط واضح لمستقبلات P2X7 ومسار NLRP3 inflammasome، وذلك من خلال خفض التعبير اﻠﭼينى لكل من NLRP3 وCaspase-1. فى المقابل، عزز الإريثروبويتين بشكل ملحوظ من التعبير اﻠﭼينى لكل من PI3K وAkt، وكذلك من مستويات p-PI3K وp-Akt  فى أنسجة الكلى.

ولأول مرة، أظهر الإسكولين حماية فعالة ضد إصابة الكلى الناتجة عن الإقفار/إعادة التروية، بينما أظهر العلاج المشترك مع الإريثروبويتين حماية كلوية قصوى عند مقارنته بكل علاج منفصل، مما يجعلهما نهجًا علاجيًا واعدًا من خلال تثبيط الإجهاد التأكسدى، والالتهاب، وتلف الأنابيب الكلوية والخلايا البطانية، وموت الخلايا المبرمج، وتعبير مستقبلات P2X7، مع تفعيل مسار PI3K/Akt.